组蛋白乙酰化和去乙酰化对基因表达有何影响(组蛋白乙酰化会使组蛋白与DNA结合更紧密)
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作者:亢小玉(转载请注:解螺旋·医生科研助手)
分析的文章题目为:Egr-1 and RNA POL II facilitate glioma cell GDNF tranion induced by histone hyperacetylation in promoter II(回复170515下载文献)
本文作者首先提出一个假设,组蛋白H3k9在GDNF启动子II区的高度乙酰化,组蛋白H3k9的高度乙酰化显著增加了Egr1与GDNF启动子区的结合,以及RNA聚合酶II募集到GDNF启动子区,从而促进GDNF在胶质瘤细胞中的高转录。
根据作者的题目和摘要的内容,首先想带入大家先了解下面的概念,以促使阅读者对文章做出更深刻的理解,这是小主人自己做的拙劣图。
乙酰化:指将乙酰基转移到氨基酸侧链基因上的过程,最常见的是组蛋白乙酰化。如图Fig1为细胞中DNA与组蛋白存在的形态图。
一般来说,乙酰化修饰能够中和组蛋白尾巴上碱性氨基酸残基上的正电荷,减弱组蛋白与带有负电荷的DNA之间的结合,选择性地使得某些染色质区域的结构从紧密变得分散,有利于转录因子与DNA结合,从而促进某些基因的转录,增强基因的表达水平。
转录因子(Tf)与RNA聚合酶。
2.在正常脑组织,低级别胶质瘤,高级别胶质肿瘤组织中以及正常星形胶质细胞和大鼠C6细胞中,观察RNApolIl在Egr1与GDNF启动子区的结合位点处的募集水平。
结果显示:高级别胶质瘤组织组织中及C6细胞中,RNApolIl在Egr1与GDNF启动子区的结合位点处的募集水平显著增高(如原图)。
3.在体内和体外共同探讨转录因子Egr-1的转录水平以及蛋白表达水平。
在正常脑组织,低级别胶质瘤,高级别胶质肿瘤组织中以及正常星形胶质细胞和大鼠C6细胞中观察Egr-1的转录水平以及蛋白表达水平。
结果显示:Egr-1的转录水平以及蛋白表达水平在高级别胶质肿瘤组织和大鼠C6细胞中显著增高。
第二步,总---把已经证实的现象有根据的联系汇总
1.在大鼠胶质瘤细胞C6内过表达Egr-1后,观察Egr-1在GDNF启动子区结合位点的水平变化,RNApolIl募集量以及GDNF的转录水平。
结果显示:在大鼠胶质瘤细胞C6内过表达Egr-1后,Egr-1在GDNF启动子区结合位点的结合量增加,RNApolIl募集到GDNF的启动子区的水平增加,以及GDNF的转录水平也显著增高(如原图)。至此,该作者已经证明出Egr-1影响了GDNF的转录。
2.为证明组蛋白乙酰化是不是影响Egr-1促进GDNF的高转录,作者进行了反向验证,当组蛋白低乙酰化水平的时候,观察GDNF的转录能力。
结果显示,在大鼠胶质瘤细胞C6内过表达Egr-1后,使组蛋白H3k9低乙酰化,抑制了GDNF的高转录能力(如原图)。
3.最后作者锦上添花的证明了Egr-1转录因子与RNA聚合酶Il之间的结合关系。
结果显示两者是有共同存在的区域,但两者是不相互结合的,如原图。
以上便是这篇深度好文的主要内容剖析,没有高大上的实验技术,但依然走在科研的最高端,谢谢大家的赏析。
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